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M5 RNase inhibitor使用说明书

产品名称           单位              货号

M5 RNase inhibitor       2500U         MF010-01

M5 RNase inhibitor      5×2500U        MF010-05

【储存条件】

长期保存，请置于-20˚C，有效期24个月。

【产品简介】

M5 RNase inhibitor采用亲和层析法从人胎盘中分离纯化的RNA酶抑制剂，可与RNase非共价结合，形成1:1的复合物，具有广谱的RNase抑制活性。尿素及巯基类试剂可以解离本品与RNase形成的复合物，使RNase复活而RNase Inhibitor不可逆失活，因此反应体系中应避免尿素及巯基类试剂存在。广谱抑制：抑制常见的RNase，包括RNase A、RNase B、RNase C和人胎盘RNase，不抑制RNase T1和RNase H。兼容性好：不影响M-MLV或AMV Reverse Transcriptase、Taq DNA Polymerase、T3、T7或SP6 RNA Polymerase活性，在较宽的pH范围内（pH 5~8）均可发挥作用。

【单位定义】

一个活性单位（U）定义为：抑制5ng RNase A 的50%活性所需的RNase Inhibitor量。

【产品组分】

RNase Inhibitor (40 U/μl)        62.5 μl  

【适用范围】

cDNA 合成反应, 提高多聚核糖体的产量和活性

体外无细胞系统转录或翻译(Cell-free in vitro transcription or translation system)

【使用方法】

以 cDNA 第一条链合成为例：

在一无 RNA 酶的离心管中配制 20μl 的反应液：

模板 RNA                                1~5μg

5× M5 M-MuLV RT Buffer                     4 μl

10 mM dNTP Mix                            1 μl

Oligo d(T) 15~18 或 Random Primer      50 pmol

M5 RNase inhibitor                         0.5 μl

M5 M-MuLV Reverse Transcriptase            1 μl

DEPC-ddH₂O                       补足至 20 μl

42˚C(Oligo (dT)15~18 Primer) 或 25˚C(Random Primer) 放置 10 分钟；

42˚C温浴 50 分钟；

70˚C加热 15 分钟；

将样品移入冰中冷却 2 分钟，然后进行后续实验或冷冻保存。

【备注】

本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时，本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。