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说明书：

MF308-M5 Hiper miRNA荧光定量PCR检测试剂盒.pdf

【产品简介】

miRNA荧光定量PCR检测试剂盒采用本试剂盒采用SYBR® Green I 嵌合荧光法的原理进行miRNA 荧光定量检测。本试剂盒包含miRNA 荧光定量检测的所有试剂，包括2×miRNA qPCR Mix和Reverse primer。2×miRNA qPCR Mix（含Sybr Green）是专门为miRNA 定量检测而研发的新一代预混形式的荧光定量PCR 检测试剂，其中的DNA polymerase 采用的是抗体修饰的热启动形式， 配合特殊的Buffer 体系，使反应特异性更好，灵敏度更高，并能在更广的范围内进行准确定量。

【产品组份】

                                           MF308-01

2× M5 miRNA qPCR Mixture (with Sybrgreen)     1250 μl

Reverse Primer (10 μM)                          55 μl

【自备实验材料】: 

1. 分子生物学实验级别的水（无核酸酶）

2. 待检测miRNA对应的qPCR上游引物（Forward primer）

【Forward Primer设计原则】

1. 遵循引物设计的最普遍原则。

2. 以成熟的miRNA 序列为基础，将U 替换成T，这是最基础和最简单的设计方法。

3. 试剂盒中提供的下游引物的Tm 值为65℃，设计上游引物的Tm 值要尽量保证在65℃左右。

4. 若按照原则2 的方式直接设计的引物其Tm 值过低，可以在引物的5’端添加几个碱基（最好为G 或C 碱基）；也可以在3’端添加1 个或几个A 碱基；或者5’端和3’端同时修饰。

5. 若按照原则2 的方式直接设计的引物其Tm 值过高，可以在引物的5’或3’端去掉几个碱基。